Lærðu um RFLP og DNA Analysis Applications

Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) er sameindafræðileg aðferð við erfðafræðilega greiningu sem gerir einstaklingum kleift að greina á grundvelli einstakra mynstur takmarkunar ensímskera á tilteknum svæðum DNA.

Einnig vísað til sem RFLP greining, nýtir tæknin fjölbrigðin í erfðafræðilegum kóða einstakra einstaklinga. Jafnvel þó að allir meðlimir í tegundum hafi í meginatriðum sömu erfðafræðilegan smekk, þá eru þessar smávægilegar munur grein fyrir afbrigði á svipgerð, svo sem útliti eða umbrotum, milli einstaklinga.

RFLP: Greiningartækni og forrit

RFLP greiningartækni felur í sér að klippa tiltekið svæði DNA með þekktri breytileika, með takmörkun ensímum, síðan aðskilja DNA brotin með agarósa hlaup rafskaut og ákvarða fjölda brot og hlutfallslegra stærða.

Takmörkun ensím er ensím, prótein sameind, sem sker DNA á takmörkunarsvæðum. Í grundvallaratriðum er DNA sýnið brotið upp og melt niður með takmörkun ensímunum. Afbrigðin sem myndast eru aðskilin eftir lengd þeirra og mynstur brotstærða mun vera mismunandi fyrir hvern einstakling sem er prófaður.

Fullur RFLP ferli krefst rannsaka merkingar, DNA sundrungu, rafgreiningu, blotting, hybridization, þvottur og autoradiography. Sýnt RFLP er sýnt með því að nota röntgenmynd með sjálfvirkri myndun, þar sem hægt er að skoða og greina DNA DNA brot eftir að þau eru skilin frá rafhverfi.

Sumar umsókna um RFLP greiningu innihalda:

Aðferðin við að nota RFLP greiningu á breytileika í genum er mikilvægt tæki í kortlagningu erfða og erfðafræðilegrar sjúkdómsgreiningar. Ef leitað er að tilteknu sjúkdómsgeni í ákveðnu litningi, þá munu vísindamenn greina DNA fjölskyldumeðlimi með sjúkdómnum og leita þá svipaðrar arfleifðar í RFLP alleles.

Þegar sjúkdómsgen er staðbundin gæti verið að greint sé frá flutningsgetu stökkbrigða genanna eða merki um heildar sjúkdómsáhættu með því að framkvæma RFLP greiningu á öðrum fjölskyldumeðlimum. Það er mikilvægt að hafa í huga að RFLP tækni er ekki mikið notaður nú þegar nýrri, sterkari tækni er notuð til DNA greiningu í réttar vísindum og nokkrum öðrum sviðum.

Neikvæð hlið greiningarinnar

Því miður er RFLP greiningartækin leiðinlegur og hægur. Til viðbótar við að krefjast mikils magns DNA úr sýni - sýnið ætti venjulega að vera um það bil fjórðungur sem er tiltölulega stór fyrir DNA sýni - ferlið, frá rannsaka merkingu til þvottar og sjálfgeislunar, getur tekið allt að fullan mánuð til að ljúka.

Niðurstöður úr mannlegu erfðafræðideildinni hafa nánast skipt út fyrir þörfina fyrir RFLP. Verkefnið er leyft til að ákvarða alla röð DNA sem er að finna í mönnum frumum, genamengi mannsins og til að auðkenna öll genin í genamengi mannsins.