Þessar dælur geta verið notaðir til líffræðilegra nota við nánast hlutlausan pH
Þrír pKa gildi fyrir fosfórsýru (úr CRC Handbook of Chemistry and Physics) eru 2,16, 7,21 og 12,32. Mónódíumfosfat og samsetta basa þess, tvínatríumfosfat er venjulega notað til að mynda dælur með pH-gildi um 7, fyrir líffræðilega notkun, eins og sýnt er hér.
Gerð þessa biðminni er svolítið erfiðara en að gera TAE og TBE biðminni. Það er hins vegar ekki mjög erfitt. Einfaldlega meðaltal. Það ætti að taka u.þ.b. 10 mínútur til að svipta upp þessa biðminni. Hér er hvernig.
1. Ákveðið á eiginleikum Buffer
Áður en búnaður er settur upp, ættir þú fyrst að vita hvaða mólgun þú vilt vera, hvaða rúmmál þú átt að gera og hvaða pH-gildi sem þú vilt. Flestir biðminnir virka best við styrk milli 0,1 M og 10 M. Sýrustigið ætti að vera innan 1 pH-einingar af sýru / samtengdu basanum pKa. Einfaldlega er þetta útreikningur sýnis fyrir 1 lítra af biðminni.
2. Ákvarða hlutfallið af sýru til basa
Notaðu Henderson-Hasselbalch jöfnuna (hér fyrir neðan) til að ákvarða hvaða hlutfall af sýru til basa er nauðsynlegt til að búa til biðminni með viðeigandi pH. Notaðu pKa gildi næst viðkomandi pH og hlutfallið mun vísa til sýru-basa samruna parið sem samsvarar því pKa.
HH jafngildi: pH = pKa + log ([Base] / [Acid])
Fyrir buffer með pH 6,9, [Base] / [Acid] = 0.4898
Í staðinn fyrir [Sýr] og leysa fyrir [Base]
Óskað mólhlutfall biðminni er summan af [Súr] + [Base].
Fyrir 1 M biðminni, [Base] + [Acid] = 1 og [Base] = 1 - [Acid]
Með því að skipta þessu inn í hlutfallið jöfnu, úr skrefi 2, færðu:
[Sýra] = 0,6712 mól / L
Leysa fyrir [sýru]
Notkun jöfnu: [Base] = 1 - [Acid], þú getur reiknað það:
[Base] = 0.3288 mól / L
3. Blandið sýru- og samrunaefnið
Eftir að þú hefur notað Henderson-Hasselbalch jöfnuna til að reikna út hvaða hlutfall af sýru til basa er þörf fyrir biðminni skaltu búa til rétt undir 1 lítra af lausn með því að nota rétt magn magnesíumfosfat og tvínatríumfosfat.
4. Athugaðu pH
Notaðu pH-rannsakanda til að staðfesta að rétt pH fyrir stuðpúðann sé náð. Stilla örlítið eftir þörfum, með fosfórsýru eða natríumhýdroxíði (NaOH).
5. Réttu hljóðstyrkinn
Eftir að pH-gildi sem náðst hefur verið náð skal færa rúmmálið af biðminni í 1 lítra. Þynnið síðan stuðpúðann eins og óskað er eftir. Sama biðminni er hægt að þynna til að búa til 0,5 M, 0,1 M, 0,05 M eða eitthvað sem er á milli.
6. Ábendingar um stuðninginn
Mundu að pKa er ekki auðvelt að mæla nákvæmlega gildi. Nokkuð mismunandi gildi gætu verið tiltækar í bókmenntum frá mismunandi aðilum.
7. Það sem þú þarft
Til að búa til biðminni þarftu þrjú efni, en þau efni sem eftir eru eru búnaður. Efnin eru mónódíumfosfat, tvínatríumfosfat og fosfórsýra eða natríumhýdroxíð til að stilla pH.
Þú þarft einnig pH metra og rannsaka og viðeigandi labware. Þetta felur í sér mæliflösku, útskriftarhylki, bikarglas og hræra.
Að lokum þarftu að hræra hitaborð.