Frostþurrkun, eða frostþurrkun, er stutt rannsóknarstofa
Grundvallaratriði frostþurrkunar
Einn af bestu leiðunum til að geyma bakteríu-, sveppa-, ger eða aðra örverufræðslu í langan tíma er að nota frystþurrkunina. Þessi stutta rannsóknaraðferð má framkvæma með hvaða frystiþurrku sem er til sölu sem mun varðveita menningarheiminn þinn. Vegna þess að frostþurrkun er flóknasta og dýrasta þurrkunarferlið, er ferlið venjulega takmörkuð við viðkvæma, hita-næmur efni af háu gildi. Efni sem ekki eru skemmdir með frystingu geta yfirleitt verið frostþurrkaðir þannig að geymsla í kæli sé óþarfa.
Þetta ferli getur tekið eins lítið og þrjár klukkustundir, og svo lengi sem 24 klukkustundir, þar með talið ekki vöxtur menningar.
Skref fyrir skref aðferð frostþurrkunar
Fyrst skaltu vaxa yfir nótt, eða grasið, af örverunni á LB eða öðrum viðeigandi næringarefnum agarplötu.
Næst skaltu búa til dauðhreinsaðar hylki með hettuglasi með því að hrista sjálfan sig á undan með því að húfurnar (gúmmítapparnir) settu lauslega ofan á. Setjið pappírsmerki prentuð með auðkenningu menningarins innan röranna fyrir autoclaving. Að öðrum kosti skaltu nota rör með húfur sem eru hannaðar til dauðhreinsunar .
Bætið 4 ml frostþurrkunarstuðul við plötuna. Ef nauðsyn krefur er hægt að fresta frumunum með því að nota sæfða glerstöng.
Snúðu strax menningarviflausninni yfir í sæfðu hettuglösin. Bætið u.þ.b. 1,5 ml fyrir hvert hettuglas. Seal með gúmmílokinu.
Frystið menningarviflausnina inni í hettuglösum með því að setja hettuglösin í -20 gráður af Celsius frysti.
Þegar ræktunin er fryst, undirbúið frostþurrkann með því að kveikja á því og leyfa tíma til að hita við viðeigandi hitastig og lofttæmi. Gerðu þetta í samræmi við leiðbeiningar framleiðanda fyrir tiltekna tegund frystþurrkara sem þú notar.
Varlega og smitgát skaltu setja hettuglösin hettuglöslega á toppi hettuglassanna þannig að raka geti flúið meðan á frostþurrkunarferlinu stendur og settu hettuglösin í frostþurrkarklefa. Notið lofttæmið í hólfið samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda.
Leyfa menningartíma að fullkomlega frostþurrka (þurrka út). Þetta getur tekið frá nokkrum klukkustundum að nóttu til eftir því hversu mikið af hverju sýni er og hversu mörg sýni þú hefur.
Taktu sýnin úr frostþurrkarklefanum í samræmi við leiðbeiningar framleiðanda og innsiglið hettuglasið strax með gúmmíhettunum og síðan kremunum.
Geymið frostþurrkaða ræktunarsýnið við stofuhita.
Vörur sem þú þarft
- Frostþurrkari
- Næringarefni eða önnur viðeigandi agarplötum (og ræktunarbúa til vaxtaræktunar)
- Glerstangir
- Frostþurrkunarstuðull
- Hettuglös með sprungu með gúmmítappa (og crimper til að hylja)
- Frystir
Tilvísun:
SP Scientific. Grundvallarreglur frostþurrkunar. http://www.spscientific.com/freeze-drying-lyophilization-basics/